新型冠状病毒核酸检测
- 什么是核酸
核酸包括脱氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)两种。所有生物的遗传物质不是DNA就是RNA。有细胞结构的生物以及含有DNA的病毒的遗传物质都是DNA,只有RNA病毒的遗传物质是RNA,恰巧,新冠病毒就是RNA病毒,他们的遗传物质就是RNA。 核酸检测其实是检测受测者体内是否有新冠病毒的核酸(RNA)。
不同病毒的所含的核糖核苷酸数量和排列顺序不同,使得每种病毒都具有特异性。
新冠病毒的核酸也是独特的,核酸检测就是对新冠病毒的核酸进行特异性检测。在进行核酸检测之前,需要采集受测者的痰液、咽拭子、肺泡灌洗液、血液等样本,对这些样本进行检测,就可以发现受测者的呼吸道感染了什么病菌。新冠病毒核酸检测常用的是咽拭子样本检测,将样本裂解提纯,从中提取出可能存在的新冠病毒核酸,检测的准备工作就做好了。
- 核酸检测如何让病毒”显形“的
新冠病毒核酸检测主要用荧光定量RT-PCR技术,这种技术是荧光定量PCR技术与RT-PCR技术的结合。在检测过程中,先采用RT-PCR技术将新冠病毒的核酸(RNA)逆转录为对应的脱氧核糖核酸(DNA);再采用荧光定量PCR技术,将得到的DNA进行大量复制,同时,使用特异性探针对复制得到的DNA进行检测,打上标记。如果存在新冠病毒核酸,仪器就可以检测到荧光信号,而且,随着DNA的不断复制,荧光信号不断增强,这样就间接检测到了新冠病毒的存在。
- 核酸检测过程:
- 提取病毒的RNA
先从样本中提取出病毒的RNA。具体来说,就是在样本中加入核酸提取试剂,把病毒破坏,让核酸释放出来。
- 把病毒RNA“反转录”成cDNA
通过反转录技术(RT),把病毒的RNA“反转”成一种特异DNA,即cDNA (因为病毒RNA结构不稳定,所以把病毒RNA转换成稳定的cDNA会更方便检测)
这里会用到核酸检测试剂盒中一种叫“反转录酶”的物质。而完成转录后,所有工作都将围绕cDNA展开。
- 进行cDNA的扩增与检测
简单说就是扩增cDNA的数量。这里应用的就是PCR,全称聚合酶链式反应。具体来说,就是借助试剂盒中一些特殊物质,让cDNA不断复制,使其数量呈指数式增长。
所谓RT-PCR,就是将RNA的反转录(RT)和cDNA的扩增(PCR)相结合的技术。
当cDNA扩增的同时,试剂盒中还有一种叫荧光探针的东西同时工作。它会释放荧光信号,cDNA每完成一次扩增,荧光信号就会增加一点,而PCR检测仪就能记录到一个荧光信号增加的Ct值。
- 出结果
这一步就是根据检测仪记录的Ct值,进行检测结果分析。
理想状态下,如果样本中有新冠病毒,那么在cDNA完成预订次数的扩增后,检测仪记录的Ct值就会形成一个逐渐上升的S形曲线,检测结果为阳性;如果没有类似的S型曲线,检测结果就为阴性。
做完以上所有工作,通常需要4~6小时。
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